题目：
指出在pH 2.5、pH 3.5、pH 6、pH 8、pH 11.4时，4种核苷酸所带的电荷数(或所带电荷数多少的比较)，并回答下列问题：
(1)电泳分离4种核苷酸时，缓冲液应取哪个pH值比较合适此时它们是向哪一极移动移动的快慢顺序如何
(2)当要把上述4种核苷酸吸附于阴离子交换树脂柱上时，应调到什么pH值
(3)如果用洗脱液对阴离子交换树脂上的4种核苷酸进行洗脱分离时，洗脱液应调到什么pH值这4种核苷酸上的洗脱顺序如何为什么
答案：
参考答案：4种核苷酸带电荷情况：
pH 2.5 pH 3.5 pH 6.0 pH 8.0 pH 11.4
UMP 负电荷最多 -1.00 -1.5 -2 -3
GMP 负电荷较多 -0.95 -1.5 -2 -3
AMP 负电荷较少 -0.46 -1.5 -2 -2
CMP 带正电荷 -0.16 -1.5 -2 -2
(1)电泳分离4种核苷酸时应取pH 3.5的缓冲液，在该pH值时，4种单核苷酸之间所带负电荷差异较大，它们都向正极移动，但移动的速度不同，依次为：UMP＞GMP＞AMP＞CMP。
(2)应取pH 8.0，这样可使核苷酸带较多负电荷，利于吸附于阴离子交换树脂柱。虽然pH 11.4时核苷酸带有更多的负电荷，但pH过高对树脂不利。
(3)洗脱液应调到pH 2.5。当不考虑树脂的非极性吸附时洗脱顺序为CMP＞AMP＞GMP＞UMP(根据pH 2.5时核苷酸负电荷的多少来决定洗脱速度)，但实际上核苷酸和聚苯乙烯阴离子交换树脂之、间存在着非极性吸附，嘌呤碱基的非极性吸附是嘧啶碱基的3倍。静电吸附与非极性吸附共同作用的结果使洗脱顺序为：CMP＞AMP＞UMP＞GMP。
